報告書番号

U94028

タイトル（和文）

有用植物作出に関する検討－イネ種子貯蔵タンパク質グルテリン遺伝子における発現制御領域の解析－

タイトル（英文）

5'deletion analysis for promoter region of rice seed storoge protein glutelin gene in transgenic tobacco

概要 （図表や脚注は「報告書全文」に掲載しております）

イネの種子貯蔵タンパク質であるグルテリンの遺伝子群のうち、他のグルテリン遺伝子とはｍＲＮＡ転写レベルで発現時期が異なることが示されているＧｌｕＡ３遺伝子について、その発現を制御しているプロモーター領域の解析を行なった。ＧｌｕＡ３の転写制御領域の５’上流域（－８９７～＋１８）を段階的に削除し、ホタルルシフェラーゼ遺伝子をレポーターとして用いて、タバコ種子における発現を調ベた。その結果、①－８３９から－７６０の領域には弱い負の転写制御配列が、また－４３７から－３１７の領域には重要な正の転写制御配列が存在すること、②－８９７から－４３７のうち活性の量的制御を行う領域とは異なる領域に発現時期を制御する塩基配列が存在すること、③グルテリン遺伝子の組織特異的発現は、各グルテリン遺伝子の転写開始点近傍の配列によって制御されていること、などが推察された。

概要 （英文）

To identify cis-acting elements responsible for the temporally and spatially specific expression,successive deletion mutants of the 5' control regions of GluA-3 gene were generated.The deleted genes were fused to the firefly luciferase(LUX)reporter geneand introduced into previously transformed tobacco,in which a chimeric gene consisted of the other glutelin(GluB-2)promoter and B-glucuronidase(GUS)reporter gene had been already introduced as a relative marker to examine the temporal expression.The quantitative fluorometric analysis of seeds,leaves,roots and stems of the transformed tobacco indicated the seed specific expression.It was confirmed that there are two elements,a weak negative element(-839/-760)and a major positive element(-437/-317),for the quantitative expression.The seed specific expression seemed to be regulated by the proximal region at least down stream of position -138 of GluA-3 promoter. Histochemical and fluorometric staining followed these results and restricted the spate specificity to the endosperms.While the difference in the temporal specificity was exactly existed between the native GluA-3 and GluB-2 promoter gene expression, the specificity was completely disappeared when the GluA-3 promoter sequence was deleted to the position-437.This change in the temporal manure suggested the existence of an element,affected the early expression of GluA-3 gene,between the sequence-839and-437.

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